بررسی بیان پروتئین پوششی و تولید آنتی¬بادی علیه پروتئین حرکتی ویروس پیچیدگی زرد برگ گوجه¬فرنگی

پایان نامه
  • وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده کشاورزی
  • نویسنده سجاد مرادی
  • استاد راهنما مسعود شمس بخش
  • تعداد صفحات: ۱۵ صفحه ی اول
  • سال انتشار 1392
چکیده

گوجه¬فرنگی از لحاظ اقتصادی مهمترین، و از لحاظ میزان تولید دومین محصول کشاورزی ایران است. ویروس پیچیدگی¬زرد برگ گوجه¬فرنگی (tylcv) مهمترین بیمارگر ویروسی این محصول در مناطق گرمسیر، نیمه¬گرمسیر و گلخانه¬ها به شمار می-رود به طوری¬که در برخی مواردتمام محصول را ازبین می¬برد. به منظور تولید آنتی¬بادی و تهیه کیت تشخیص و ردیابی این ویروس مهم، پروتئین پوششی ویروس جهت بررسی بیان در سیستم بیانی pet-e.coli مورد استفاده قرار گرفت. ژن رمز کننده پروتئین پوششی در ناقل بیانی pet26b(+) همسانه¬سازی گردید و پس از توالی¬یابی و اطمینان از صحت همسانه¬سازی جهت بیان به سویه¬های bl21(de3) و(de3) rosetta باکتری e.coli منتقل شد. با وجود تلاش فراوان و القا در غلظت¬های مختلف iptg در دماها و زمان¬های متفاوت، به دلایل نامشخص، میزانی از بیان که قابل استخراج جهت استفاده به عنوان آنتی¬ژن باشد مشاهده نشد. در ادامه تلاش برای تولید آنتی¬بادی علیه ویروس جهت تهیه کیت تشخیصی، پروتئین حرکتی همسانه¬سازی شده ویروس از باکتری استخراج و به خرگوش تزریق شد. آنتی¬سرم تهیه شده، به منظور بررسی کارایی در تشخیص ویروس در آزمون¬های وسترن¬بلات و الایزا مورد استفاده قرار گرفت. در آزمون وسترن¬بلات باند 13 کیلو دالتونی مربوط به پروتئین حرکتی ویروس ردیابی شد. در آزمون الایزا با وجود میزان جذب بیشتر در نمونه¬های گیاهان آلوده، اختلافات مقدار جذب در گیاه سالم و آلوده از لحاظ آماری معنی دار نبود. این نتایج نشان می¬دهند که سیستم معمول pet-e.coli برای بیان پروتئین پوششی این ویروس کارایی ندارد. همچنین آنتی¬سرم تولید شده علیه پروتئین حرکتی، برای آنالیزهای وسترن بلات در گیاهان آلوده مناسب¬تر است و برای استفاده در آزمون الایزا نیاز به استخراج آنتی بادی دارد.

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

تولید آنتی بادی پلی کلونال علیه پروتئین حرکتی ویروس پیچیدگی زرد برگ گوجه فرنگی و بررسی کارآیی آن در ردیابی ویروس

بیماری ویروسی پیچیدگی ­زرد برگ گوجه ­فرنگی از مهم­ترین بیماری­های ویروسی گوجه­ فرنگی (solanum lycopersicum l.) در مناطق گرمسیری و نیمه ­گرمسیری و گلخانه­های مناطق معتدل جهان به شمار می­رود. به منظور تولید آنتی­ بادی علیه ویروس عامل بیماری برای استفاده در ردیابی و معرفی کیت تشخیص بیماری، پروتئین حرکتی همسانه ­سازی شده ویروس در ناقل بیانی pet26(b)+، از سویه bl21(de3) باکتری escherichia coli بیان ...

متن کامل

بیان پروتئین پوششی ویروس ایرانی پیچیدگی بوته چغندرقند در باکتری Escherichia coli

بیماری پیچیدگی بوته چغندرقند در ایران با دو گونه ویروس ایرانی پیچیدگی بوته چغندرقند (Beet curly top Iran virus, BCTIV) و ویروس پیچیدگی بوته چغندرقند (BCTVBeet curly top virus,)ایجاد می­ شود. به منظور بیان پروتئین پوششی BCTIV، قطعه کامل چارچوب خوانش V1 اینویروس، با تعبیه محل­ های برشی دو آنزیم Bam HIو Hind III به ترتیب در انتهای ¢5 آغازگرهای اختصاصی رو به جلو ...

متن کامل

فراوانی ویروس های پیچیدگی بوته چغندرقند و بیان پروتئین پوششی ویروس ایرانی پیچیدگی بوته چغندرقند

چکیده یک جدایه از ویروس پیچیدگی شدید بوته ی چغندرقند (bsctv-ir) و ویروس ایرانی پیچیدگی بوته ی چغندرقند (bctirv) به عنوان عوامل پیچیدگی بوته ی چغندرقند و گیاهان دولپه ای در ایران شناخته شده اند. به منظور بررسی تنوع ژنتیکی در بین جدایه های این دو ویروس در طی فصل های زراعی 89-88 و 90-89 نمونه برداری از مزارع چغندرقند، گوجه فرنگی، فلفل، لوبیا، شلغم، تربچه و بادمجان پنج استان خراسان رضوی، فارس، کرم...

15 صفحه اول

بیان ژن پروتئین پوششی ویروس ایرانی پیچیدگی برگ چغندرقند(bctiv) در باکتریescherichia coli

چکیده ویروس ایرانی پیچیدگی برگ چغندرقند (bctiv) جدید ترین عضو جنس کرتوویروس است که اخیرا از ایران گزارش شده است. به منظور ردیابی و شناسایی این ویروس در طبیعت، از روش های سرولوژیکی مبتنی برواکنش آنتی بادی-آنتی ژن و روش های مولکولی استفاده می شود. تحقیق حاضر با هدف تسهیل فرآیند شناسایی سرولوژیکی ویروس با استفاده از تولید آنتی بادی نوترکیب، پایه ریزی شد. بدین منظور، در ابتدا ژن پروتئین پوششی ویرو...

بررسی ویروس پیچیدگی برگ زرد گوجه فرنگی در استان بوشهر

گوجه‌فرنگی یکی از سبزیجات مهم و بیماری پیچیدگی برگ زرد گوجه‌فرنگی از مهمترین بیماریهای گوجه‌فرنگی در سراسر دنیاست. طی فصل‌های زمستان 1391 و بهار 1392، به منظور بررسی ویروس پیچیدگی برگ زرد گوجه فرنگی در استان بوشهر از مزارع کشت گوجه فرنگی واقع در شهرستانهای تنگ ارم، دشتستان و چند بخش مربوط به آن از گیاهان مشکوک به آلودگی نمونه برداری شد. پس از استخراج DNA، واکنش زنجیره ای پلیمراز با استفاده از آ...

متن کامل

بررسی ساختار و روابط تبارزایی پروتئین پوششی جدایه‌های ویروس موزائیک زرد لوبیا از مزارع باقلای ایران

ویروس موزائیک زرد لوبیا (Bean yellow mosaic virus) یکی از ویروس‌های متعلق به جنس پوتی‌ویروس، دارای دامنه میزبانی وسیع و پراکندگی جغرافیایی گسترده‌ای می‌باشد. این ویروس سالیانه خسارت بالایی به حبوبات مختلف از جمله باقلا در ایران وارد می‌کند. در این پژوهش13 جدایه‌ ویروس موزائیک زرد لوبیا از مزارع باقلای استان‌های مختلف ایران (استان‌های سیستان و بلوچستان، هرمزگان، کرمان، خوزستان، فارس، لرستان، ایل...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده کشاورزی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023